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Por favor, use este identificador para citar o enlazar este ítem: http://repositorio.utmachala.edu.ec/handle/48000/15063
Título : Estudio de seroprevalencia de diarrea viral bovina, en el cantón santa rosa por medio de enzyme linked inmunosorbent assay (elisa)
Autor : Moreno Peña, Lida Alejandra
Director(es): Aguilar Galvez, Fernando Lenin
Palabras clave : BOVINO;DIARREA;ANTICUERPOS;SUSTRATO
Fecha de publicación : 2019
Editorial : Machala : Universidad Técnica de Machala
Citación : Moreno Peña, L. A. (2019) Estudio de seroprevalencia de diarrea viral bovina, en el cantón santa rosa por medio de enzyme linked inmunosorbent assay (elisa) (trabajo de titulación). UTMACH, Unidad Académica de Ciencias Agropecuarias, Machala, Ecuador.
Descripción : La Diarrea Viral Bovina es una enfermedad que se encuentra a nivel mundial en todas las ganaderías siendo la principal causa de grandes pérdidas económicas, ya que afectan de forma significativa la reproducción de los animales y es de fácil diseminación. El agente etiológico es un Pestivirus de la familia Flaviviridae perteneciente a un virus de de ARN con una nucleocápside proteica rodeada por una membrana fosfolipídica con proteínas estructurales y no estructurales. El virus puede transmitirse de forma vertical y horizontal por forma directa e indirecta, siendo la forma indirecta la primordial fuente de infección transmitida por animales infectados, fómites, de forma transplacentaria o por fluidos seminales. El objetivo de esta presente investigación es determinar la presencia de DVB a través de la aplicación del método de Elisa en las muestras obtenidas de las ganaderías del Cantón Santa Rosa. El presente trabajo de investigación se llevó a cabo en el Cantón Santa Rosa de la Provincia de El Oro, realizándose en dos etapas, la Etapa I se tuvo lugar en las 3 ganaderías de leche ubicadas en el Cantón Santa Rosa. Las ganaderías “Nicvanna” ubicada a 1km Vía Puerto Jeli con sus coordenadas 3º25'49.6''S - 79º59'00.3''W, “Las Lomas” ubicada Vía la Troncal de la Costa, 2 km antes del restaurante Campestre con las coordenadas 3º30'10.6''S - 79º58'53''W, “Karfel” ubicada Vía Bella María, cerca al Estero Medina con coordenadas geográficas 3º28'11.7''S - 79º55'57,6''W. Y la etapa II se lo realizó en el Laboratorio de Biología Molecular de la Facultad de Ciencias Agropecuarias de la Universidad Técnica de Machala. La metodología de este trabajo fue recolectar 145 muestras de las 3 ganaderías con una población total de 150 cabezas de ganado, proveniente del Cantón Santa Rosa, considerando animales que presentaron o no sintomatología de la posible infección en ellos estuvieron las vacas de ordeño, vacas secas, vaquillas y ternero. Las muestras se recolectaron en los tubos vacutainer tapa roja 10 ml y fueron transportadas en cadena de frio con geles a las instalaciones de la Universidad para su posterior centrifugación y separación el suero se almacenó hasta terminar el total de animales. Se realizó la técnica inmunoenzimatica de ELISA mediante un Kit comercial CIVTEST BOVIS BVD/BD P80 de la Marca HIPRA. El kit se basa en una Elisa de bloqueo debido a que está diseñado para detectar anticuerpos frente a una proteína específica presente en las cepas de BVD (PNE p80), el principio del el test es discriminar la presencia como resultado positivo (sin coloración) o ausencia como resultado negativo (aparición de color amarillo). Las variables de la presente investigación fueron animales enfermos (positivos, positivo bajos, negativo bajo y negativos), raza (mestizo, Brahamn mestizo, Pardo Suizo, Holstein, Gyr), edad (0-1,4 año; 1,5- 5,4 años; 5,5-12 años), vacunación del animal (vacunados y no vacunados) y sexo (hembra y macho). La presente investigación dio como resultado un total de 16 animales positivos a la presencia de anticuerpos de diarrea viral bovina representando el 11,04% del total muestreado, considerado como positivo mientras que los Negativos son de 129 animales representados con un 88,97%. Se concluye la presente investigación con la determinación de la presencia del virus de diarrea viral bovina en el Cantón Santa Rosa a través de la técnica de Elisa (Enzyme Linked Inmunosorbent Assay). Se recomienda manejo, vacunación y ampliar este tipo de investigación por su importancia en toda la provincia y la determinación del virus por técnicas de respaldo molecular.
Resumen : Bovine Viral Diarrhea is a disease that is found worldwide in all livestock being the main cause of major economic losses, as it significantly affects the reproduction of animals and is easily disseminated. The etiological agent is a Pestivirus of the family Flaviviridae belonging to an RNA virus with a protein nucleocapsid surrounded by a phospholipid membrane with structural and non-structural proteins. The virus can be transmitted vertically and horizontally by direct and indirect means, the indirect form being the primary source of infection transmitted by infected animals, fomites, transplacental or seminal fluids. The objective of this research is to determine the presence of BVD through the application of Elisa's method in samples obtained from livestock in Canton Santa Rosa. The present research work was carried out in Canton Santa Rosa of the Province of El Oro, being carried out in two stages, Stage I took place in the 3 dairy farms located in Canton Santa Rosa. The farms "Nicvanna" located at 1km Via Puerto Jeli with its coordinates 3º25'49.6''S - 79º59'00.3''W, "Las Lomas" located Via la Troncal de la Costa, 2 km before the restaurant Campestre with the coordinates 3º30'10.6''S - 79º58'53''W, "Karfel" located Via Bella María, near Estero Medina with geographical coordinates 3º28'11.7''S - 79º55'57,6''W. Stage II was carried out in the Molecular Biology Laboratory of the Faculty of Agricultural Sciences of the Technical University of Machala. The methodology of this work was to collect 145 samples from the 3 cattle farms with a total population of 150 heads of cattle, from Canton Santa Rosa, considering animals that presented or not symptoms of possible infection in them were milking cows, dry cows, heifers and calves. The samples were collected in the tubes vacutainer red cap 10 ml and were transported in cold chain with gels to the facilities of the University for its later centrifugation and separation the serum was stored until finishing the total of animals. The ELISA immunoenzymatic technique was performed using a commercial Kit CIVTEST BOVIS BVD/BD P80 of the HIPRA brand. The kit is based on a blocking Elisa because it is designed to detect antibodies against a specific protein present in BVD strains (PNE p80), the principle of the test is to discriminate the presence as positive result (no coloration) or absence as negative result (appearance of yellow color). The variables of the present investigation were sick animals (positive, positive low, negative low and negative), race (mestizo, Brahamn mestizo, Brown Swiss, Holstein, Gyr), age (0-1.4 years; 1.5-5.4 years; 5.5-12 years), vaccination of the animal (vaccinated and unvaccinated) and sex (female and male). The present investigation gave as a result a total of 16 positive animals to the presence of antibodies of bovine viral diarrhea representing 11.04% of the total sampled, considered as positive whereas the Negatives are 129 animals represented with 88.97%. The present investigation is concluded with the determination of the presence of bovine viral diarrhea virus in Canton Santa Rosa through the technique of Elisa (Enzyme Linked Inmunosorbent Assay). It is recommended to manage, vaccinate and expand this type of research because of its importance in the whole province and the determination of the virus by molecular support techniques.
URI : http://repositorio.utmachala.edu.ec/handle/48000/15063
Aparece en las colecciones: Trabajo de Titulación Medicina Veterinaria y Zootecnia

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